近年来，随着分子生物学和遗传学研究的深入，人们试图用分子手段进行预防、诊断和治疗肺癌。CerbB2基因是Semba等于1985年发现的一种原癌基因，其表达产物P185neu蛋白是一种具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白，被异常激活后可导致细胞增殖、癌变。大量研究显示，非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer, NSCLC)组织中存在P185neu蛋白过度表达。但是，其在非小细胞肺癌患者血清中的含量少见报道，在非小细胞肺癌组织中的含量未见报道。因此，本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbentassay, ELISA)对非小细胞肺癌患者手术前、后血清及癌组织中P185neu的含量进行了定量检测，以观察P185neu在非小细胞肺癌组织和血清中的含量及与肺癌临床病理特征的关系，为临床肺癌的诊断及治疗提供依据。
字串3
1 材料与方法
字串3
1.1 研究对象 选择2005年8月至2006年1月在西安交通大学医学院第一附属医院胸外科行非小细胞肺癌手术治疗、无肝炎、糖尿病以及免疫系统疾病等合并症的患者37例，其中男25例，女12例，年龄45-70(平均57.78)岁；鳞癌21例，腺癌16例。病理分期(pTNM)：Ⅰ期与Ⅱ期20例，Ⅲ期10例，Ⅳ期7例。另外，选择健康志愿者10例和肺良性病患者7例作为对照组。 字串3
1.2 试剂及方法 采用双抗体夹心ELISA法。抗P185neu单克隆抗体(包被抗体)，P185neu标准品及辣根过氧化物酶标记的P185neu多克隆抗体(酶标抗体)均由四川省肿瘤医院肿瘤内科张智慧教授提供。96孔酶标硬板购自武汉博士德生物工程有限公司。包被缓冲液、酶结合抗体缓冲液、匀浆介质、牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)、考马斯亮兰G250染料均由西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系提供。底物显色液及反应终止液由深圳晶美生物工程有限公司生产。抽取良性病例组及肺癌病例组术前1d、术后3d及术后10d清晨空腹静脉血2mL，分离血清，低温(-80℃)冻存待检。另外，良性病例组及肺癌病例组均于手术当日切取病变组织，称重后放入液氮中冻藏，随后制作组织匀浆，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定组织匀浆中的P185neu含量。 字串3
1.3 结果判断 根据P185neu标准品的不同浓度及其对应的吸光度(A值)制作标准曲线，计算回归方程，得出P185neu浓度与吸光度之间的直线方程，再根据样本的吸光度，利用回归方程计算出样本中P185neu的浓度。血清样本中P185neu浓度再乘以稀释倍数，得出最终结果，单位为ng/mL。组织匀浆样本中P185neu浓度再除以各组织匀浆样本总蛋白的浓度，得出单位重量组织匀浆样本中P185neu的浓度，单位为ng/mg protein。 字串1
1.4 统计学处理 用SPSS10.0软件包进行统计学处理。每组数据均采用±s表示，统计学分析采用t检验，分组比较采用方差分析，两两比较采用q检验及相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。
字串4
2 结果
字串4
2.1 NSCLC组、良性病例及健康对照组术前血清中的P185neu含量的比较 NSCLC组、良性病例及健康对照组术前血清中P185neu含量分别为(8.95±1.59)ng/mL，(6.51±0.54)ng/mL，(6.16±0.56)ng/mL，单因素方差分析显示三组之间P185neu的含量存在显著性差异(F=20.882, P<0.01)；两两比较分析，NSCLC组P185neu含量明显高于良性病例组及健康对照组(P=0.001)，良性病例组与健康对照组之间无显著性差异(P=0.217)。
字串9
2.2 NSCLC组和良性病例组癌组织匀浆中P185neu含量的比较 NSCLC组和良性病例组组织匀浆中P185neu的含量分别为(16.86±2.79)ng/mg protein，(10.27±0.94)ng/mg protein，独立样本t检验显示P185neu的含量具有显著性差异(t=6.04，P<0.01)，NSCLC组显著高于良性病例组。 字串4
2.3 NSCLC患者术前血清及癌组织匀浆中P185neu含量与肺癌病理特征的关系 NSCLC患者术前血清中P185neu含量与有无淋巴结转移、肿瘤大小、细胞分化程度及TNM分期之间有显著性差异(P<0.05)。NSCLC癌组织匀浆中P185neu含量与有无淋巴结转移、细胞分化程度及TNM分期之间有显著性差异(P<0.05，表1)。
收藏
推荐
评论(0条)
