系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫性疾病，存在免疫功能的紊乱，但其发病机制及机体内免疫调节细胞的具体变化尚未完全明确。本研究采用特异性荧光抗体标记流式细胞术，探讨SLE患者在疾病的不同阶段外周血CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞的变化，为阐述SLE患者存在的免疫功能紊乱、揭示SLE的发病机制提供实验依据。
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1 资料与方法
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1.1 临床资料
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SLE患者30例，其中女29例，男1例，年龄17岁~54岁，平均年龄31.8岁，所有病例均符合1982年美国风湿病学会（ARA）修订的SLE诊断标准［1］。采用1992年欧洲SLE活动性评分标准判断SLE的病情活动性［2］。其中活动期SLE 18例（活动期患者未用糖皮质激素），非活动期SLE 12例,正常对照组为20例健康志愿者。 字串9
1.2 主要试剂和仪器
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双色标记单抗CD3+、CD4+分别与FITC、PE荧光素结合；含beads的TrueCount管;CaliBRITEbeads;FACS溶血素（均为美国BD公司产品）。FACS Calibur流式细胞仪（美国BD公司）。 字串3
1.3 实验方法 字串6
标本处理：抽患者外周血2 ml,用肝素钠抗凝管保存，6 h内分析;向TrueCount管中分别加入20 μl抗体和50 μl的抗凝全血,振荡混匀3 s，避光放置15 min；加入FACS（1X）溶血素2 ml，充分混匀，室温避光10 min；1 000 rpm/min离心5 min,弃上清；加入2 ml PBS洗一次;800 rpm/min离心5 min,弃上清；流式细胞仪上机检测。数据获取与分析使用CaliBRITE标准微球、FACSComp软件调节FACS Calibur流式细胞仪PMT电压、荧光补偿、灵敏度，应用SimulSET分析软件对处理好的标本进行CD3+、CD4+、CD8+相对计数。 字串1
1.4 统计学分析
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采用SPSS 8.0统计软件，所有数据以均数标±准差（±s）表示，组间比较采用t检验进行数据分析。
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2 结果 字串9
SLE患者外周血T细胞亚群检测结果见表1，SLE活动期患者与正常组比较CD4+细胞数明显降低（P<0.05）；CD4+/CD8+比值降低（P<0.05）。SLE活动期患者与正常组比CD8+细胞数差异无显著性（P>0.05）。表1 SLE患者与正常人T淋巴细胞亚群比较（略）注：*与正常对照组比较，P<0.05；Δ与正常对照组比较，P>0.05。
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3 讨论
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正常免疫应答过程有依赖于各种免疫细胞，特别是各T细胞亚群之间的相互协作和相互制约。若某一T细胞亚群的数量和功能发生异常，机制就出现免疫紊乱，并发生一系列病理变化。SLE是一种自身免疫性疾病，存在免疫调节功能紊乱。国内外对SLE患者T细胞亚群的研究有很多，但结果不太一致。过去多数研究认为［3］在SLE活动期，CD4+（辅助/诱导T细胞）升高，CD8+（抑制/杀伤T细胞）下降，CD4+/CD8+比值升高，认为SLE的发病与上述T细胞亚群的改变有关，尤其是CD8+下降引起B细胞多克隆抗体激活及体液免疫异常。但近年的研究［1，5］却发现SLE 活动期CD8+细胞变化不大，或者反向升高。本实验结果也显示：活动期SLE患者的CD8+细胞与正常对照组比较差异无显著性（P>0.05），CD4+细胞数明显降低（P<0.05）；CD4+/CD8+比值降低（P<0.05）；CD3+、CD8+在SLE活动期、SLE非活动期、正常对照组之间差异无显著性（P>0.05）。有进一步研究发现CD8+细胞亚群具有明显的异质性,活动期SLE患者的CD8+细胞几乎全部反抑制性T细胞（CD8+VV+）取代，不能显示抑制功能,因而阻断了CD8+细胞对CD4+细胞的抑制作用［5］,另一方面CD4+细胞减少，主要原因是CD4+亚群中的抑制诱导T细胞(CD4+2H4+ )降低T细胞不能诱导CD8+细胞对B细胞产生抑制作用［6］，因此活动期SLE患者中,CD4+细胞降低, CD8+细胞正常或升高,仍然表现为体液免疫的亢进B细胞增殖并产生大量的自然抗体。
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